陽離子交換柱層析的洗脫順序是先酸、后中性、然后再堿性,陽離子交換柱層析的洗脫需要用到離子交換劑,陽離子交換柱一般都是使用HCL溶液洗脫。
陽離子交換柱層析的原理
離子交換柱層析是使用離子交換劑(一種具有離子交換特性的物質(zhì))作為固定相,用于與流動相中的特定離子進行可逆交換,從而分離離子型混合物的層析方法
離子交換柱層析主要依賴于電荷之間的相互作用,并利用帶電分子的電荷之間的細微差異進行分離。它具有很高的分離能力。離子交換柱層析廣泛用于生物聚合物的分離,中間純化和純化過程中,因為幾乎所有生物聚合物都是極性的并且可以帶電荷。
離子交換劑的類型
將帶電的活性基團引入惰性載體
取決于活性官能團的不同電荷的特性
陽離子交換劑
與帶負電荷的陽離子交換
陰離子交換劑
帶正電并交換陰離子
陰離子交換樹脂對化學(xué)物質(zhì)和熱的穩(wěn)定性不如陽離子交換樹脂。
陽離子交換樹脂的洗脫順序:
用于水處理的陽離子交換柱層析的洗脫順序:酸<中性<堿性。
陽離子交換樹脂的洗脫順序主要與樹脂的親和力有關(guān),最重要的是靜電吸引,其次是疏水相互作用。
樹脂顆粒越大,就需要更多的洗脫液才可達到洗脫效果。
在稀溶液中,樹脂上的電荷越高,樹脂的親和力越高。
樹脂的洗脫與溶液中的離子濃度有關(guān),濃度越低,洗脫就越容易,濃度越高,洗脫就越困難。
陽離子交換樹脂通常使用鹽酸溶液作為洗脫劑,但是陰離子交換樹脂具有三種洗脫劑:鹽酸溶液,氯化鈉和氫氧化鈉溶液。三種都可以用作陰離子樹脂的洗脫液,對于某些具有相似分配系數(shù)的離子,可以使用含有有機絡(luò)合劑或有機溶劑的洗脫液。這樣可以有效地提高選擇性。
陽離子交換樹脂可用HCL溶液洗脫。用HCl溶液洗脫后,陽離子樹脂可轉(zhuǎn)化為氫樹脂,陰離子交換樹脂可使用NaCl或NaOH溶液作為洗脫劑,并可轉(zhuǎn)化為氯樹脂或氫氧化物。樹脂打字后,使用HCL溶液,NaCl或NaOH溶液作為洗脫液,樹脂再生過程完成,不需要再生,并且即使在用純水清洗后也可以使用,因此非常方便。
陽離子交換柱層析的洗脫影響因素
陽離子交換柱色譜的洗脫順序取決于與樹脂的親和力,主要是靜電吸引,然后是疏水相互作用。例如,氨基酸和陽離子交換樹脂之間的吸引力主要是堿性氨基酸大于中性且大于酸性。因此,洗脫順序是酸性氨基酸先洗脫,疏水相互作用也有作用。
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