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陽離子交換柱層析原理
2020-09-29 09:54:56admin 3816
陽離子交換柱層析原理是利用樹脂的電荷基團(tuán)與水中的離子發(fā)生反應(yīng),從而分離水中的混合物這就是層析。

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陽離子交換柱層析原理是利用樹脂的電荷基團(tuán)與水中的離子發(fā)生反應(yīng),從而分離水中的混合物這就是層析。

 

什么是離子交換柱層析

離子交換柱層析使用離子交換樹脂(一種具有離子交換特性的物質(zhì))作為固定相,用于與流動(dòng)相中的特定離子進(jìn)行可逆交換,從而分離混合物的層析方法

 

例如,陽離子交換樹脂對離子的結(jié)合力按以下順序。 Li +蛋白質(zhì)和其他生物聚合物通常是兩性的,它們與陽離子交換樹脂的結(jié)合主要與它們的性質(zhì)和pH有關(guān)。以用陽離子交換樹脂分離蛋白質(zhì)為例,在某些pH條件下,等電點(diǎn)pI pH的蛋白質(zhì)帶正電,并且可以與陽離子交換樹脂結(jié)合。通常pI越高,蛋白質(zhì)與離子交換樹脂的結(jié)合越強(qiáng)。

 

陽離子交換柱層析原理

層析法的最基本特征是它具有固定相和流動(dòng)相。當(dāng)由于混合物成分的物理和化學(xué)性質(zhì)(吸附,溶解度,分子形狀和大小,分子等)使兩相相互移動(dòng)時(shí),由于電荷和親和力等的不同,使兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配而得到分離。

 

離子交換柱層析是基于各種離子或離子化合物的分離和純化,以及離子交換樹脂的結(jié)合強(qiáng)度。離子交換柱層析的固定相是一種離子交換樹脂,由一種不溶于水的惰性聚合物基質(zhì)形成,該基質(zhì)通過特定的化學(xué)反應(yīng)共價(jià)連接至特定的電荷基團(tuán)。離子交換樹脂可分為三部分:聚合物基質(zhì),電荷基團(tuán)和抗衡離子。

 

電荷基團(tuán)與聚合物共鍵形成離子可交換的電荷基團(tuán)??购怆x子是與帶電基團(tuán)結(jié)合的抗衡離子,可與溶液中的其他離子基團(tuán)發(fā)生可逆交換反應(yīng)。抗衡離子帶正電的離子交換樹脂可以交換成帶正電的離子基團(tuán),稱為陽離子交換樹脂。帶負(fù)電荷離子交換樹脂的抗衡離子交換帶負(fù)電荷的離子基團(tuán),被稱為陰離子交換樹脂。

 

陽離子交換柱的使用方法

1.交換

將測試溶液添加到交換柱中,并使用活塞控制交換的特定流速。片刻之后上層樹脂全部被交換、下層未被交換,中間則部分被交換,這一段稱為“交界層”。

 

2.裝柱

離子交換通常在離子交換柱中進(jìn)行。離子交換柱通常由玻璃制成,并且在安裝交換柱時(shí),將一層玻璃絲鋪設(shè)在交換柱的下端,倒入少量水,并倒入含有水的樹脂。樹脂下沉以形成交換層。安裝離子交換柱時(shí),請確保在樹脂層中沒有氣泡殘留,以便在更換過程中測試溶液不與樹脂接觸。樹脂的高度通常為柱高度的約90%。還應(yīng)在離子交換柱的頂部放置一層玻璃纖維,以防止添加測試溶液時(shí)樹脂被洗掉。安裝更換離子交換柱后,請用蒸餾水清洗并關(guān)閉活塞以供使用。由于不能讓樹脂暴露于空氣中,溶液的添加會(huì)在樹脂間隙中形成氣穴,導(dǎo)致交換不徹底。


 

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